疾病模型＆免疫缺陷鼠
SCID Beige
该品系为 Prkdcscid 和 Lystbg 常染色体隐性突变同类系 (congenic) 小鼠，由 Croy 等在 Guelph 大学通过 C.B-17-Prkdcscid 和 C57BL/6-Lystbg 小鼠的杂交得到。该品系 B、T 淋巴细胞功能缺失，同时自然杀伤细胞 (NK细胞) 功能低下，SCID Beige 小鼠主要脏器重量除脾脏和胰腺减重外，其它内脏连续增加，年龄都会影响总胆固醇和高密度载脂胆固醇浓度。
特征
该突变基因小鼠血清中缺乏免疫球蛋白，其细胞在活体外对测试 B 或 T 细胞功能的免疫学实验不发生反应，在组织病理反面表现为淋巴组织重度淋巴细胞减少。
用途
1.应用于人类生理学、病理学、免疫学和血液病学等方面的研究。
2.能接受人体正常组织的移植而成为一种嵌合体小鼠（即SCID-hu模型）进行人体免疫功能重建和肿瘤学方面的研究。
生理生化数据
基因鉴定报告：
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样本信息和目的：
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样本：SCID Beige小鼠
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目的：确认SCID Beige小鼠基因修饰类型
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靶基因：Prkdc Protein kinase, DNA activated, catalytic polypeptide
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NCBI号：19090
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NCBI链接：https//www.ncbi.nlm.nih.gov/gene/19090
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靶基因2：Lyst lysosomal trafficking regulator
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Gene ID：17101
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NCBI链接：https//www.ncbi.nlm.nih.gov/gene/17101
方法和结果
PRKDC（Protein kinase, DNA activated, catalytic polypeptide，DNA 依赖性蛋白激酶，又名 scid）能识别和传递DNA 断裂损伤信号，当细胞 DNA 发生断裂损伤后，PRKDC 复合物就聚合在损伤位点上，随之蛋白激酶被活化，募集并磷酸化其下游的 DNA 修复蛋白启动DNA断裂修复。此外，PRKDC 在维持端粒稳定性，免疫蛋白质的位置特异性重组中也发挥重要的作用。Prkdc 基因位于小鼠 16 号染色体上，有 87 个外显子。
由之前的 NOD-SCID 小鼠鉴定报告（SPF2020102001ZJY）发现：SCID 系列小鼠的基因突变类型为 Prkdc 基因85号外显子发生单核苷酸改变（T突变为A）后，提前引入终止密码子，导致蛋白翻译提前终止。碱基突变后PRKDC蛋白预测将截短83个氨基酸。我们使用该报告（SPF2020102001ZJY）中的鉴定引物（Prkdc-ex85-F：5'-TATGTGGACTTCTTCTCACC-3' Prkdc-ex85-R: 5'-GGTAAAGCCGCCCTAAGAGT-3'，产物长度：454 bp ）、以 6 个 SCID Beige（BG）小鼠的鼠尾基因组为模板进行PCR扩增，电泳结果如下：
每两个 PCR 产物混合并进行 Sanger 测序结果，结果显示（图 3 ）：6 只 BG 小鼠的均为 Prkdc 基因 85 号外显 子单核苷酸改变（T 突变为 A），即为 SCID 基因突变。
Lyst（lysosomal trafficking regulator，溶酶体转运调节因子；又名 Beige）是一种蛋白质编码基因，并可能参与色素沉着。Lyst 基因突变可能与 Chediak-Higashi综合征（CHS）相关。Lyst 基因位于 13 号染色体上，有 55 个外显子（图 4）。
但 Lyst 基因转录本201（http://asia.ensembl.org/Mus_musculus/Tran/Exons?db=core; g=ENSMUSG00000019726; r=13:13590397-13778803;t=ENSMUST00000110559）仅显示 53 个外显子（图 5）。文献报道显示，BG 小鼠的 Lyst 基因突变是“外显子 54 中 3bp 缺失的结果，导致该蛋白羧基末端附近的 3741 位密码子处异亮氨酸缺失”，在转录本 201 中比对显示基因突变位置位于 Lyst 基因外显子 52 上。针对Lyst基因外显子52 和53 设计引物：bg-Ex52-F:5’-TGCAGTAGGTTATCCTGGCA-3’,bg-Ex52-R:5’-GAAGCCTTCACACCTGCATTC-3’（扩增长度303bp）; bg-ex53-1F:5’-CAGTCTGCTGGCCGTCTTTT-3’,bg-ex53-1R:5’-TGGGTGTGCTGAGTATAGGG-3’（扩增长度 631bp），并进行 PCR 扩增和测序（图6）。比对结果显示，Lyst 基因外显子52 有 3bp 缺失（CAT），导致该蛋白 3740 位和 3741 位密码子处两个异亮氨酸突变为 1 个异亮氨酸（图7-8）；外显子 53 无突变（结果未显示）。
结论
斯贝福（北京）生物技术有限公司 SCID Beige 小鼠的基因编辑类型为：Lyst 基因外显子 52 有 3bp 缺失（CAT），导致该蛋白 3740 位和 3741 位密码子处两个异亮氨酸突变为 1 个异亮氨酸；Prkdc 基因 85 号外显子单核苷酸改变（T 突变为 A）。
