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疾病模型&免疫缺陷鼠
ApoE-疾病模型小鼠
货号:9-12周
规格:雄/雌
品牌:斯贝福
ApoE小鼠
ApoE 基因敲除小鼠是通过同源重组技术制备的具有 3 号外显子纯合缺失的小鼠模型。2017 年斯贝福(北 京)生物技术有限公司从国家啮齿类实验动物种子中心引入培育。
特征

ApoE 小鼠模型表现出异常高血脂症状,在 3 月龄时即出现动脉脂肪堆积,17 月龄时小鼠脑内将出现脂瘤性纤维瘤。

学习记忆能力出现障碍,其与 CHD、高脂血症、脑梗塞、AD 及慢性乙型肝炎等疾病相关。

用途

用于研究 ApoE 基因相关疾病,如糖尿病与肥胖研究,心血管研究,动脉粥样硬化研究以及新陈代谢研究。

成长曲线
生理生化数据

系周龄

APOE (8 weeks)

单位

细胞计数

WBC (109/L)

3.03±0.45

2.53±0.56

中性粒细胞计数

Neu  (109/L)

0.47±0.11

0.46±0.14

巴细胞计数

Lym  (109/L)

2.46±0.36

1.99±0.45

核细胞计数

Mon (109/L)

0.08±0.06

0.06±0.03

酸性粒细胞计数

Eos  (109/L)

0.02±0.01

0.02±0.01

碱性粒细胞计数

Bas  (109/L)

0±0

0±0

中性粒细胞比例

Neu (%)

15.12±2.28

18.12±3.37

巴细胞比例

Lym  (%)

81.18±3.59

78.44±3.55

核细胞比例

Mon  (%)

2.66±1.99

2.18±0.96

酸性粒细胞比例

Eos  (%)

0.86±0.25

1.14±0.43

碱性粒细胞比例

Bas  (%)

0.18±0.13

0.12±0.07

细胞计数

RBC (1012/L)

7.53±0.32

8.03±0.39

红蛋白浓度

HGB (g/L)

121.9±5.36

127±5.48

细胞压积

HCT (%)

37.11±1.75

39.51±1.91

均红细胞体积

MCV (fL)

49.28±0.89

49.2±0.62

平均红细胞血红蛋白含

MCH (pg)

16.18±0.16

15.83±0.14

平均红细胞血红蛋白浓

MCHC (g/L)

328.8±3.82

321.9±3.08

细胞分布宽度变异系数

RDW-CV (%)

12.33±0.71

11.74±0.58

细胞分布宽度标准差

RDW-SD (fL)

25.71±1.74

24.18±1.37

小板计数

PLT (109/L)

623.9±124.87

922.5±138.75

均血小板体积

MPV (fL)

4.9±0.2

4.65±0.17

小板体积分布宽度

PDW

15.19±0.12

15.18±0.11

小板压积

PCT (%)

0.3±0.06

0.43±0.05


系周龄

APOE (8 weeks)

单位

丙转氨酶

ALT

U/L

25.97±4.16

33.53±5.96

草转氨酶

AST

U/L

110.09±30.51

138.67±32.16

血清钙

Ca

mmol/L

1.56±0.29

1.38±0.41

血清磷

P

mmol/L

11.83±1.18

8±0.54

血糖

Glu-G

mmol/L

3.34±0.47

3.16±0.69

碱性磷酸

ALP

U/L

219.99±31.41

276.42±39.34

γ-谷氨酰转肽酶

γ-GT

U/L

-0.18±3.87

0.76±1.22

清总蛋白

TP

g/L

51.4±1.97

49.12±3.43

α-淀粉酶

α-AMY

U/L

2966.21±362.29

2700.54±423.1

清甘油三酯

TG

mmol/L

965.51±475.65

753.89±154.62

固醇

TC

mmol/L

525.54±151.66

491.61±46.91

肌酸激酶

CK

U/L

31.06±1.26

29.13±1.8

酸脱氢酶

LDH

U/L

31.7±6.4

23.16±2.77

清白蛋白

ALB 

g/L

11.63±1.66

8.88±0.93

脂肪酶

LIP

U/L

2.59±0.35

2.37±0.17

尿素氮

UREA

mmol/L

2.43±0.16

2.19±0.15

血清镁

Mg 

mmol/L

1.48±0.08

1.38±0.06

样本信息和目的
  • 样本:
    ApoE小鼠
  • 目的:
    确认ApoE小鼠基因修饰类型
  • 靶基因:
    ApoE apolipoprotein E(apoE)
  • NCBI号:
    11816
  • NCBI链接:
    https//www.ncbi.nlm.nih.gov/gene/11816
方法和结果

ApoE(apolipoprotein E)是载脂蛋白 E,一种脂肪结合蛋白(载脂蛋白),乳糜微粒和中密度脂蛋白(IDLs)的一部分。ApoE 主要负责运输脂蛋白、脂溶性维生素及胆固醇。ApoE 基因位于 Chr7 上,共有 7 个外显子。

查询目前所有 ApoE 敲除品系的设计方案和基因型鉴定方案,结果显示目前的方案主要有两种:胚胎干细胞技术和 CRISPR/Cas9 方案,针对两种方案分别设计扩增和测序引物,具体方案如表1:

ApoE 纯合子靶基因 PCR 扩增及琼脂糖凝胶电泳结果如图 2,结果显示,该动物为 ES 干细胞法制作的 ApoE 突变小鼠。
注:1、2为方案1扩增结果,3、4为方案2扩增结果,5、6为方案3扩增结果。1、3、5泳道基因组模板为ApoE小鼠,2、4、6泳道为空白对照组,模板为水。

ApoE 突变小鼠是 Nobuyo Maeda 博士在 The University of North Carolina 开发的,他们使用胚胎干细胞技术产生 ApoE 基因突变的小鼠品系,质粒载体设计方案如图 3:

使用oIMR0180和oIMR0182 引物对靶基因进行扩增,并进行双向 Sanger 测序。与 NCBI 报道的 ApoE 基因外显子序(https://www.ncbi.nlm.nih.gov/nuccore/NM_009696.4)比对,结果显示:oIMR0180 引物正向测序比对失败(结果未显示),oIMR0182 反向测序,ApoE 基因 3 号外显子部分序列可以拟合。ApoE 基因外显子序列上 289 号碱基开始3号外显子剩余序列被Neo基因(新霉素抗性基因 )所取代(如图 4)。ApoE 基因其他外显子扩增测序结果未显示突变。

结论

斯贝福(北京)生物技术有限公司 ApoE 小鼠的基因编辑类型为:ApoE 基因3号外显子部分碱基(125bp)和部分内含子被 Neo 基因取代,其他外显子无突变。

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