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疾病模型&免疫缺陷鼠
db/db-疾病模型小鼠
货号:1-8周
规格:雄/雌
品牌:斯贝福
db/db小鼠
db/db 小鼠为瘦素受体自发性突变小鼠,由 Bar Harbor 于 1966 年在 C57BLKS/J(BKS)近交系中发现。
特征

多食、消渴、多尿、极度肥胖。表型的严重程度受基因背景的影响。

表现出心肌病、周围神经病变、糖尿病视网膜病变、伤口愈合迟滞等糖尿病并发症。

易肥胖,体重增长快,活动减少,血脂高,幼年时血糖和胰岛素增长不明显,后期血糖和胰岛素水平上升。

相对于野生型小鼠,db/db 小鼠能够增加胰岛素的敏感性,脂肪细胞也有所增加。

用途

db/db 小鼠用于糖尿病与肥胖、代谢、伤口愈合、免疫与炎症、内分泌、生殖等方面的研究。T2D 型糖尿病模型,应用于糖尿病的药物筛选、肥胖症的生理生化指标及药物治疗等的研究。

dbdb小鼠血糖

样本信息和目的
  • 样本:
    db/db小鼠
  • 目的:
    确认db/db小鼠基因修饰类型
  • 靶基因:
    Lepr leptin receptor
  • Gene ID:
    16847
  • NCBI链接:
    https//www.ncbi.nlm.nih.gov/gene/16847
方法和结果

LRPR(leptin receptor,瘦素受体,又名db )蛋白属于细胞因子受体 gp130 家族,该蛋白通过激活胞质 STAT蛋白来刺激基因转录。LRPR 是瘦素(调节体重的脂肪细胞特异性激素)的受体,并参与脂肪代谢的调节以及正常淋巴细胞生成所需要的新型造血途径。该基因的突变与肥胖和垂体功能障碍有关。Lepr基因位于小鼠 4 号染色体上,有 21 个外显子(图1)。

文献查询显示,db/db 小鼠 Lepr 基因中内含子从 G 到 T 的转化产生了一个供体剪接位点,该剪接位点导致异常剪接,导致 Ob-Rb 剪接形式的长细胞结构域过早终止,失去其信号转导功能,我们以 db/db 小鼠、C57 小鼠(6-10)和灰色小鼠(m/m)的基因组为模板、使用文献(Acta Pharmacologica Sinica (2018) 39: 117–123)中报道的引物:
FO-1:5′-TTGTTCCCTTGTTCTTATACCTATTCTGA-3′
RO-1:5′-CTGTAACAAAATAGGTTCTGACAGCAAC-3′
FI-1:5′- ATTAGAAGATGTTTACATTTTGATGGAAGG-3′
RI-1:5′- GTCATTCAAACCATAGTTTAGGTTTGTCTA-3′
纯合子:610bp 和 406bp;野生型:610bp 和 264bp;杂合子:610bp、406bp 和 264bp 进行 Lepr 基因的扩增,结果显示:db/db 纯合子表现出 610bp 和 406bp 两条带,C57 小鼠(6-10)和灰色小鼠(m/m)表现出 610bp 和406bp 两条带,符合文献报道。同时对 db/db 小鼠的 610bp 条带进行测序,结果显示在内含子 18(转录本 201E18-E19 中)上有一个 G 到 T 的突变。此外,为了鉴定 db/db 小鼠 lepr 基因无其他突变,我们对 Lepr 基因的外显子进行全测序。Lepr 基因有多个转录本信息(图 2),为了检测 db/db小鼠基因突变类型,我们使用转录本 201(外显子有 19 个)设计各外显子的 PCR扩增和测序引物(表 1),并对 db/db 小鼠的 DNA 模板进行 19 个外显子进行 PCR 扩增和测序。

http://asia.ensembl.org/Mus_musculus/Tran/Exons?db=core;g=ENSMUSG00000057722; r=4:101717404-101815352;t=ENSMUST0000003755

结论

斯贝福(北京)生物技术有限公司db/db小鼠的基因编辑类型为:Lepr基因内含子 18(转录本201 E18-E19中)上有一个 G 到 T 的突变。

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